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    金邊螞蟥在各成長階段不同含血量情況下抗凝血活性的変化

    日期:2019年02月18日 編輯:ad200901081555315985 作者:論文網 點擊次數:2132
    論文價格:50元/篇 論文編號:lw201902181337259164 論文字數:3050 所屬欄目:醫藥學論文
    論文地區:中國 論文語種:中文 論文用途:職稱論文 Thesis for Title
    [摘要] 目的:研究廣西壯藥金邊螞蟥從幼體至老年體生長過程中,及不同含血量情況下的抗凝血活性変化,為蕕取優質金邊螞蟥藥材提供參考。方法:選取不同生長階段和不同含血量的金邊螞蟥活體,以凝血酶滴定法測定其抗凝血活性。結果:金邊螞蟥幼體內抗凝血活性隨著含血量的增加呈現遞減趨勢;成年體及老年體抗凝血活性隨著含血量的增加呈現先減后增的趨勢;不同階段金邊螞蟥抗凝血活性有隨著生長階段呈遞減趨勢。結論:各生長階段的金邊螞蟥均具有抗凝血活性,以幼體表現最強,成年及老年階段含血時強弱差異不明顯.如考慮到經濟效益、獲取的難易等因素,建議選擇成年體金邊螞蟥為藥材原料。
    關鍵詞  金邊螞蟥  菲牛蛭  抗凝血活性  成長階段  含血量  凝血酶滴定法
      金邊螞蟥為醫蛭科動物菲牛蛭(Hirudinaria manillensis),列入《廣西壯族自治區壯藥質量標準壯藥典》第二卷(2011年版)[1],壯藥典里規定每1克金邊螞蟥干燥品的抗凝血酶活性不低于220.0U/克。文獻中,有對金邊螞蟥整體勻漿物以及頭部、軀干部分的抗凝血酶活性含量測定的報道[4][5],尚未見對金邊螞蟥不同生長階段、不同含血量情況下抗凝血酶活性含量的報道。金邊螞蟥是否跟其他中藥材一樣,不同生長階段藥理活性會有所不同;由于金邊螞蟥每次可吸食大于自身體重2-4倍的血液[3],體內含血量的多少是否也會影響到整體抗凝血酶活性。本文通過測定金邊螞蟥不同生長階段以及不同含血量的情況下抗凝血酶活性,為合理蕕取優質金邊螞蟥藥材提供依據。
    1、材料、儀器與試劑
    1.1  金邊螞蟥材料及選料:
    金邊螞蟥活體系從南寧市凈雪皇有限責任公司金邊螞蟥養殖場采集.分別選取饑餓狀態下生長期1個月以內、體重≤1g/條的幼體200條;生長期6-8個月、體重在3.5—4.5g/條的個體100條;生長期17-19個月、體重在9—11g/條的個體100條;所有樣本均經過廣西壯醫院莫滾教授根據壯藥材標準鑒定為醫蛭科牛蛭屬的金邊螞蟥Hirudinaria maniUensis Lesson[9],壯藥稱金邊螞蟥[1]。分別放在三個玻璃箱內,不喂食,用清水暫養30天后備用。
    1.2儀器及試劑
    HH-S2型數顯恒溫水浴鍋;LD4-1.8型速冷凍離心機;FA2004N型電子天平;凝血酶凍干粉(批準文號:國藥準字H43020121生產批號:130721-4);纖維蛋白原(牛血)(Fibrinogen,凝固物含量51%,供凝血酶效價測定用,中國食品藥品檢定研究院  ID:FHYZ-MTBO);0.9%的生理鹽水(自配);Tris緩沖液(自配)。
    1.3 試劑的制備
    2.試驗分組及樣品制備
    3.方法
    3.1  各成長階段0%含血量組抗凝血活性測定
    3.2 各成長階段65-75%含血量組及140-150%含血量組抗凝血活性測定  
    3.3  各組樣品抗凝血活性測定測定方法[2]
    4、結果   
    5、討論
    現代研究指出水蛭主要具有抗凝、抗血栓作用,而水蛭中的水蛭素( hirudin) 是迄今發現的最強的凝血酶特異性抑制劑,是水蛭中具有代表性的藥理活性物質[6][7]。吸血類品種金邊螞蟥是目前研究得較多、也是抗凝血活性較高的品種之一[8],有著非常高的藥用和經濟價值。金邊螞蟥在2011年列入《廣西壯族自治區壯藥質量標準壯藥典》第二卷(2011年版)[1]。
    笫一組中幼體階段隨著含血量從0%至140-150%增加,抗凝血活性含量反而減少。而成年和老年組則出現先降后升情況。分析原因:體內含血量多寡會對整體的抗凝血活性濃度有影響。水蛭素以及其含量的多寡可以作為藥用水蛭功效的一個重要檢驗標準問題[10][11],本次研究的結果顯示,幼年個體雖然有較高的抗凝血活性含量,但由于個體小,經濟價值不高,不適宜做為藥材使用。成年個體與老年個體,在實際使用過程中均是不同含血量的個體混合使用,平均值更能體現其實際藥效價值。從表數據看,成年個體平均含119ATU/g,雖然只有幼體平均162ATU/g的73%,但比老年體的89ATU/g高出34%。成年個體規格均重在3.5g/條以上,藥效價值較好,原料獲取比較易得,具有較高的藥用和經濟價值。
    參考文獻
    [1]廣西壯族自治區壯藥質量標準壯藥典(2011年版)[M].第二卷.廣西科學技術出版社,183-184.
    [2]國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典[ M ] . 二部. 北京: 化學工業出版社, 2005:附錄181-182.
    [3]譚恩光,黃立英,關瑩,王波等, 廣東金邊螞蟥生長和生殖的研究[J],中草藥,2002年第33卷第9期。
    [4]汪文茉,張秋海,歐興長. 水蛭頭、尾抗凝活性的比較及晾干后對活性的影響[J]. 中國中藥雜志,1998,03:48.
    [5]關世俠,袁中文,張怡,胡波. PEG聯合pH沉淀-冷凍干燥法制備金邊螞蟥活性組分[J]. 中國醫院藥學雜志,2013,15:1240-1243.
    [6]黃愛民, 黎肇炎, 廖共山, 班建東,廣西金邊螞蟥消化液中抗凝物質的分離純化,中國生化藥物雜志,2006年第 27 卷第 5 期。
    [7]張士斌. 水蛭素的基礎研究現狀及臨床應用展望[J]. 北京醫學,2006,03:173-174+177. 
    [8]張彬,汪波,龔元,于翔,呂軍儀,幾種水蛭抗凝血物質提取及活性分析,中山大學學報( 自然科學版)2012 年7 月第51 卷第4 期
    [9] 楊潼 . 中國動物志(環節動物門 • 蛭綱)[M]. 北京:科學出版社,1996:120-122.
    [10]張衛,張瑞賢,李健,梁飛,錢忠直. 中藥水蛭品種考證及資源可持續利用發展探討[J]. 中國中藥雜志,2013,06:914-918.
    [11] 吳志軍,張靈霞,于立華. 四種不同品種水蛭生物活性的研究與比較[J]. 中成藥,2006,28 ( 2) : 232 -234.
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